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细 胞 分 子 生 物 学 中 心
 流式细胞仪检测项目
流式细胞仪（Flow cytometer, FCM）是一种快速对单细胞进行测量和定量分析的仪器，由液流系统、光学系统、分选系统和数据处理系统构成，已广泛应用于基础医学和临床医学的各个方面，在细胞生物学、分子生物学、血液学、免疫学、药理学、遗传学、肿瘤学等领域对各学科的发展起着重要作用。FCM的应用范围为：细胞周期分析、DNA含量分析、DNA倍体分析、线粒体膜电位、细胞膜电位测定、细胞内pH值和离子浓度测定、凋亡细胞检测、免疫分型、细胞表面蛋白分析、HLA群体分析、移植配型、基因表达分析、细胞内药物积聚和分布分析、以及癌基因蛋白等其它细胞表面和细胞内蛋白定量分析等。带分选系统的FCM还可为PCR、FISH等分子生物学技术提供高纯度的特异细胞群。
医学实验中心的流式细胞仪为美国Beckman-Coulter公司的EPICS XL-4型产品，单激光，四色六参数，无分选系统。现开展的检测项目有：
1 人细胞CD95(Fas/Apo-1)的定性（阳性率）、定量（荧光强度）分析；
2 人细胞Bcl-2蛋白的定性（阳性率）、定量（荧光强度）分析；
3 人细胞P53的定性（阳性率）、定量（荧光强度）分析；
4 人肿瘤细胞耐药蛋白（P-gp, P-170）的定性（阳性率）、定量（荧光强度）分析
5 细胞内Caspase-3活性测定；
6 细胞内细胞色素c（cyt c）含量测定；
7 Annexin Ⅴ/PI染色检测细胞凋亡；
8 PI/Rhodamine123染色检测细胞线粒体膜电位；
9 细胞内活性氧（ROS）含量测定；
10 PI等染色检测分析细胞周期、DNA含量、DNA倍体和细胞凋亡；
11 中心具有组织细胞分离机，可代为制备实体组织的单个细胞悬液；
12 欢迎自备试剂进行其它项目的流式细胞检测、分析！
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 激光共聚焦显微镜全面对外开放
激光共聚焦扫描显微镜能对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的单个或一群细胞或者观察到局部组织的各个层面结构的三维图像，观察细胞结构、细胞骨架、染色体、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡，以及寄生虫和微生物表面和内部结构；荧光探针标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体，核酸、FISH和基因表达等分析观察；利用细胞内荧光标记探针检测细胞内pH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。可以在同一张样品上同时进行多重物质标记和同时观察；并能对获得的信息进行定量共聚焦三维图像分析
医学实验中心的激光共聚焦扫描显微镜为德国Leica公司的SP2型，配有正置（Leica DM RXA）和倒置（Leica DM IRBE）显微镜、氩及氦氖激光光源、图像输出设备以及Leica SP2分析软件系统，以及三气培养箱和制样设备。承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来仪器室进行自主科研工作。
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 毛细管电泳仪全面对外开放
毛细管电泳在药学中主要用于药物分析、中药成分分析、药物手性对映体的分析。在医学中主要用于肽、蛋白质、病毒、酶、糖、DNA、小的生物活性分子、离子、药物及其代谢物的分析。也可用于临床疾病诊断、临床药物监测、药物代谢研究、临床分子生物学测定及单细胞分析等。
医学实验中心的毛细管电泳仪为Beckman公司的P/ACE MDQ型，配紫外（UV）检测器和二极管阵列（DAD）检测器。承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来仪器室进行自主科研工作。
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 细胞培养室、分子生物学实验室、细胞生物学实验室和免疫学实验室全面对外开放
细胞培养室为万级净化，拥有全套细胞培养设施和孵育型电动倒置万能显微镜，可进行各类细胞和组织培养以及细胞学实验；
分子生物学实验室拥有高速冷冻离心机、超低温冰箱、三恒电泳仪、CO2培养箱、三气培养箱、超纯水系统、制冰机、PCR仪、凝胶成像分析系统、原位PCR仪、定量PCR仪、研究用万能电动显微镜、双红外荧光扫描分析仪、超微量电子天平、紫外交联仪、基因电转导电融合仪、分子杂交箱、恒温气浴摇床、恒温水浴摇床（双温）和电转移及真空转移系统等主要仪器设备，可进行核酸提取、电泳、分子杂交、基因扩增、基因转导、质粒扩增等分子生物学实验；
细胞生物学实验室和免疫学实验室拥有全自动酶标仪、自动洗板机、自动免疫组化染片机、细胞洗涤离心机、超声波细胞破碎机和细胞液氮冻存罐等仪器设备，可进行多数细胞学和免疫学试验。
上述3实验室均可承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来实验室进行自主科研工作。
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 低温实验室（生物样品制备实验室）建成、开放
低温实验室（生物样品制备室）拥有自动核酸蛋白制备纯化工作站、中高压蛋白层析系统、台式冷冻干燥机、真空快速浓缩仪、超速和高速冷冻离心机等；低温室面积10 m2，温度自动控制，－4℃～4℃。可进行基因芯片、测序、定量PCR及其他分子生物学研究的样品前处理、全自动分样；全自动DNA、RNA的分离纯化；全自动蛋白质小量纯化；动物、细菌、病毒DNA、RNA、mRNA以及质粒提取程序；磁珠法DNA纯化及Ni-NTA法蛋白纯化；临床样品（血样、体液、脱落细胞等）、细胞培养物、细菌、病毒、质粒DNA、总RNA、mRNA、PCR产物和蛋白的高通量、快速、自动纯化及分液。
本实验室承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来实验室进行自主科研工作。
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生物芯片实验室建成并对外开放
基因芯片的工作原理与经典的核酸分子杂交方法（southern、northern）是一致的，都是应用已知核酸序列作为探针与互补的靶核苷酸序列杂交，通过随后的信号检测进行定性与定量分析，基因芯片在一微小的基片（硅片、玻片、塑料片等）表面集成了大量的分子识别探针，能够在同一时间内平行分析大量的基因，进行大信息量的筛选与检测分析。基因芯片主要技术流程包括：芯片的设计与制备；靶基因的标记；芯片杂交与杂交信号检测。基因芯片目前的应用范围主要包括基因表达和转录图谱分析及靶序列中单碱基多态位点（ single nucleotide polymorphism，SNP）或突变点的检测，表达型芯片的目的是在杂交实验中对多个不同状态样品(不同组织或不同发育阶段、不同药物刺激)中数千基因的表达差异进行定量检测。
生物芯片实验室可进行基因芯片的制备和分析，拥有Cartesian ProSys 5510型基因芯片点样仪和Packard/GSI Express型基因芯片阅读仪，可承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来实验室进行自主科研工作。
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 核酸序列分析室建成并对外开放
核酸序列分析室拥有LI-COR 4200L-2型DNA分析系统和LI-COR Odyssey型红外荧光扫描成像系统。
LI-COR 4200L-2 型DNA分析系统可进行DNA序列分析、基因型分析、微卫星测序、STR分析、AFLP分析等
测序容量：48个样品
测序长度：单向：1000-1200bp, 双向：≥2kb；准确率：≥99.5%
基因型分析容量：3×96
 LI-COR Odyssey型红外荧光扫描成像系统可进行大面积中密度膜芯片扫描、基因型分析后目标条带的分离、Southern、Northern和Western杂交扫描成像分析、尼龙膜、硝酸纤维素膜、凝胶等扫描成像检测等。
检测方式：双色成像，双色检测，可对两个目的基因（蛋白）同时进行定性定量分析
检测灵敏度：核酸：10-18mol, 蛋白：10-12g
承接委托科研课题和接受科研人员（研究生）来实验室进行自主科研工作。
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细胞分子生物学中心开放的主要仪器名录
（1）．LEICA TCS SP2激光共聚焦显微镜
（2）．BECKMAN-COULTER Epics XL-4型流式细胞仪
（3）．BECKMAN P/ACE MDQ型毛细管电泳仪
（4）．Cotbett Roto-gene 3000型实时定量PCR仪
（5）．MJ PTC220型和PE 9700型PCR仪
（6）．MJ PTC200型原位PCR仪
（7）．Beckman XL-100K超速冷冻离心机及其它高速冷冻离心机
（8）．DAKO全自动免疫组化染片机
（9）．Bio-Tek Powerwave X200型自动酶标分析仪（全波长）
（10）．Bio-Tek ELX50洗板机
（11）．Olympus AX80型研究级电动万能显微镜（荧光、DIC）
（12）．Olympus IX81型研究级电动倒置荧光显微镜（荧光）
（13）．SYNGENE ChemiGenius2型凝胶图像分析系统（可测化学发光）
（14）．QIAGEN BioRobot 8000型自动核酸蛋白纯化工作站
（15）．Eppendorf Multiporator 4308型基因电转移电融合系统
（16）．LI-COR 4200L-2 型DNA分析系统
（17）．LI-COR Odyssey型红外荧光扫描成像系统
（18）．Mettler UMX2型超微量电子天平（0.1?g）
（19）．Cartesian ProSys 5510型基因芯片点样仪
（20）．Packard/GSI Express型基因芯片阅读仪
（21）．Robbins Model-400分子杂交箱
（22）．UVP CL-1000紫外交联仪
（23）．Heto DNA-plus型快速真空浓缩仪
（24）．Heto Lyo-lab 3000型冷冻干燥机
（25）．JY92-2D型超声波细胞破碎机
（26）．电转移及真空转移系统
（27）．Shellab SI6-2恒温气浴摇床
（28）．Heto SBD-50恒温水浴摇床（双温，配制冷循环水浴）
联系电话：
0931－8915391（办公室）
0931－8915390（实验室）
medlab@lzu.edu.cn
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